产品内容：超敏ECL液 A+超敏ECL液 B

产品规格：50ml+50ml

保存方法：2-8℃避光保存，一年有效。

产品简介
本试剂盒应用于免疫印迹实验，以化学发光法检测蛋白质。其原理是以辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体直接或间接结合膜上的目的蛋白质，在洗膜后加入本试剂盒配制的ECL工作液，即可由HRP催化发出荧光。
本产品对抗原的最低检测限可达到中飞克级，在Western blot实验中，一抗（1 mg/mL）储存液可稀释1:1,000至1:50,000倍，二抗（1mg/mL）储存液可稀释1:50,000至1:200,000倍。发光信号持久，结果可以通过X光胶片曝光或者其他适当荧光成像设备进行检测。

操作步骤
1.进行常规Western Blot。
2.ECL工作液按照1:1的比例等体积混合适量A液和B液制备。
注：工作液最好在临近使用前配制，推荐使用剂量：0.1ml工作液/cm2膜。
3.用镊子取出洗好的膜，沥干膜上洗膜液，将结合有蛋白的一面朝上，放置于洁净保鲜膜上。
4.加上配好的ECL工作液，孵育时确保工作液覆盖整张膜，室温孵育1-2min。
5.弃去印迹膜上ECL工作液，将一张洁净的保鲜膜平整的铺在印迹膜上。
6.将处理好的印迹膜置于X光片盒中，在暗室中取一张胶片小心置于膜上，曝光时间取决于膜上的发光强度，曝光后立即显影定影，或将印迹膜放置到荧光成像仪内，按仪器说明书进行检测。

注意事项
1. 本ECL试剂盒灵敏度高，需要优化好上样量、一抗、二抗浓度和稀释液、印迹膜及封闭试剂，并按照蛋白表达丰度，参考推荐的抗体稀释比例，来获得最佳实验结果。
2. 如果印迹膜上条带过亮时，建议使用膜再生液去除抗体后重新封闭孵育，并提高一抗二抗稀释比例。如果条带过暗也可将二抗稀释比例降低至1:5000至1:10,000倍，以达到最佳效果。
3. 本试剂盒A液和B液不可以相互污染，否则会降低产品的使用效果。
4. 发光强度会随时间缓慢减弱，建议在两小时内完成实验。
5. 孵育二抗后，洗膜缓冲液应避免使用叠氮钠，叠氮钠是HPR的抑制剂。
6. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服并戴一次性手套操作。